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日志


9月3日

制备色谱

(1)分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。


为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。
然而,当色谱柱上样品负载加大的时候,往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱,要解决容量与柱子效果之间的矛盾,对重现性也要考虑。从经济上来说。制备色谱要争取少用填料,少用溶剂,要尽可能多的得到产品。

(2)样品的前处理:

制备色谱柱子由于处理的样品多,比分析柱子更容易受污染,所以,必要的前处理就显得非常的必要。萃取、过滤、结晶、固相萃取等简单的分离方法,如果用得上,而且还不是很麻烦,就要尽可能多的采用以去掉杂质。

(3)制备色谱柱的材质及其特点
下面介绍一下,制备色谱柱常用的材质及其特点。


各种规格的玻璃柱子在实验室里头很容易得到,而且价格低廉,但玻璃柱子致命的弱点是它能承受的压力很小,且非常容易破碎。当由于压力太小而导致流动相流速很慢的时候,高位液面或加高压空气(或者氮气)的采用是一个简单的解决办法。在底下加真空,也能在一定程度上解决这个问题。

不锈钢柱子具有良好的耐腐蚀、抗压力性能,但其价格相对很贵。如果,只有很小的分离任务且经费也允许,市面上直径为1cm的小型制备柱就是首选。

有机玻璃柱子也能抗压力耐腐蚀,相对不锈钢柱子而言,它是半透明的,可以看到液体的运行状态,对有色的物质其特点就更为突出。

(4)固定相的选择
硅胶、键合固定相(如C18)、离子交换树脂 、聚酰胺、 氧化铝、 凝胶等都可以作为色谱柱的填料。 有不少文献报道,对填料可以进行一下处理提高了分离效果,如,对硅胶进行的硝酸银(或缓冲液)处理。

(5)装柱方法的选择 根据固定相颗粒度和柱子的尺寸,采用不同的装柱方法,往往装填越好分离效果越好。装柱效果跟填料的颗粒度关系很大,颗粒度的减少会导致装柱的难度。一般来说,颗粒直径小于20-30um的固定相采用湿法装填。所谓“敲击-装填”技术适用于颗粒直径大于25um的固定相。湿法的目的是迫使相对稀松的 固定相悬浆以高速装入色谱柱子,从而减少空隙的形成。然而,当柱直径大于20mm,所加压力为30-40bar时,高压悬浆装填技术就变得十分复杂。为将小颗粒固定相装入更大得制备型色谱柱,可采用柱长压缩技术。这种方法,先将固定相悬浆(或偶尔是干填充物)装入柱中加压,利用物理方法将其压紧。压紧的方法有两种:径向压缩和轴向压缩。 湿法装柱需要一定的设备,在柱子填完后,应用有柱效的测量,对柱效低的柱子应该重填。

(6)流动相的选择
除了和分析色谱同样的考虑外,在选用流动相时,要考虑色谱分离后面加有旋转蒸发等二次分离操作。一般来说,不宜采用高毒性溶剂,对多元溶剂要尽可能的少用。

如果产品中含有大量溶剂,溶剂的纯度也要考虑在其中。

(7)加样的方法
可以采用以下方法之一进样。-用注射器进样-用旋转阀进样-通过六通阀进样-通过主泵进样-通过辅泵进样-固体上样


(8) 泵的选用
生产制备色谱泵的厂商很多。根据有无脉冲、能承受的最大压力、控制的精度、售后服务等来选择泵。

(9)检测器的选用
一般的分析池的最大允许流速仅为5 mL/min 或者10mL/min。而专门的制备池的最大允许流速可为150mL/min。有时,采用旁路分离管,将少量流体导入分析池进行检测,是一个不错的办法,但其浓度的误差会相对较大。

(10)组分保留时间的估计
用分析柱子在同等色谱条件下(同样的固定相和流动相)测定保留时间后,按照单一组分的线流速(不是体积流速)一定,通过计算可以知道组分的大致保留时间区域。
分析谱图的峰形状,对确定保留时间也有很大的参考价值。

(11)产品的收集
手工馏分收集费时费力,自动馏分收集器有很大的方便。许多实验室和工厂都采用了馏分收集器。
(12)超载、边缘切割、中心切割、放大技术与非线性效用

在制备色谱中,因为没有必要达到分析色谱那样的分离度,可以在一定范围内大大加大进样的浓度和体积。在做分离的时候,也有一些分析色谱的时候,不能用到的技巧。因为篇幅关系,不在这里叙述。

(13)柱转换技术
通过接头或者阀门,实现柱子的简单延长,或者比较方便地实现对其中一个(或几个)组分的精制。
(14)比较新的制备色谱技术
模拟移动床可以连续进样,并可以利用边缘切割效用,而且采用了柱切换技术,能更好的利用溶剂和填料,已经应用于工业化生产。其理论和技术也日益完善。
迎头色谱、超临界流体色谱、逆流色谱环形色谱、气相制备色谱等在科研和工业生产中也得到了应用。
 

瞎忙~

关于这个主题,似乎写了几十次了吧,原来一直都在瞎忙。。。。
 
跑了一天路,除了采购就是采购;然后做未知样品全分析,貌似这个应酬有些趣味,竟然要做一个月的制备色谱 ,然后才能搞核磁,还好就要离职了,一身冷汗。
 
周末的茶话会把四哥和左手折腾够戗,一个重装系统,一个刚醒酒,还好是这哥三 个拽文言,换成那哥几个,估计就热闹了。
 
 
左手:“我只是海边玩耍的孩子 , 偶尔捡到几个贝壳而已  , 不能与大佬比”
四哥:“入夜,在屋顶上遥望北方,听蟋蟀低吟”,用左手的话说 ,那是隐士的生活,远不止小资的境界。
 
遗憾的是欢哥大驾现身,没赶上直播。
 
四哥曰:“天凉好个球”
 
9月2日

终于可以离职放大假了~

恩,终于可以休息了,好好的收拾收拾这个新窝;
应怜三义庙的旧窝竟被李杨(大佬)、河马之流弄成那等模样,其创造力足以令众人叹为观止,当然最重要的是,居然还能坦然地休养生息、新陈代谢 ,所以说,大佬之职不是你我能承当的,陈霰(左手)在这个层面上,永远过不了大佬这一关了~
 
再回头来讨论四院双雄的情况。作为相当不被看好(尤其是左手啦)的组合,四院双雄以涤荡整个11号楼554宿舍和整个材料科学与工程学院的气势,大杀四方,连下两城;紧追四哥的足迹,扯下羁绊了四年之久的单身魔咒(当然有可能扔到了左手、大佬、九千岁和我头上),面不改色的脱离了手足团队,一头扎进了伉俪大军,从此过着幸福美满、男耕女织、世外桃源、牧马放羊、挽弓射雕的时光,深刻鲜明刻骨的体现了“和谐社会“的全面风貌;在此,本人斗胆忝列代表共和国,对四院双雄表示迟到的书面祝贺,期待两位兄弟家庭幸福、和谐顺利,别忘了保重身体,有空兄弟会进京探望。
 
对照双雄的春风得意,四哥的卧薪尝胆、左手的悬梁刺股、九千岁的背井离乡、老梁的壮志微酬、敝人的四海为家,大佬的花天酒地、酒池肉林当属顶级潇洒而飘逸的体验,大佬名号实至名归;尽管大佬依然孑然一身,然左手伴侍左右亦弥补了大佬最后一处不足,尤显大佬的超脱,由此不得不与众弟兄提议,10.1哥几个杀到大佬寝宫,声色犬马,全醉方休;至于九千岁,以后大佬定会补上啊 ~
 
 
经年飘荡品苍凉,壮志未酬亦毋殇。
四海为家身背井,幕天席地自洋洋。
此约燕京会旧部,应教大佬倾款囊。
秋风又扫塞外路,明月何时载我翔。